毛細管電泳儀的使用需遵循嚴格的步驟以確保實驗的準確性和安全性,以下是具體操作流程:
1. 開機與初始化
將儀器放置在穩定水平臺面,接通電源并預熱30分鐘。打開儀器開關和配套軟件,進入控制界面。根據實驗需求選擇合適的檢測器類型,并配置儀器參數(如電壓、溫度等)。
2. 毛細管處理與安裝
用微吸管將毛細管插入樣品槽,另一端接入高壓電極接口。安裝前需用超純水、酸或堿溶液沖洗毛細管,去除雜質并平衡基線。例如,用1mol/L NaOH溶液沖洗5分鐘,再用超純水沖洗5分鐘,確保毛細管暢通且無氣泡。
3. 樣品與緩沖液準備
將樣品加入電泳缸的樣品槽,注意避免超過容積。根據實驗需求配制緩沖液,如10mmol/L NaH?PO?-Na?HPO?緩沖液,并倒入對應的緩沖液瓶。將樣品槽和緩沖液瓶放入指定托盤,記錄位置。
4. 參數設置與運行
在軟件中設置電壓、電流、進樣時間等參數。例如,設置電壓為25kV,進樣壓力30mbar,進樣時間5秒。運行前檢查檢測器配置、燈狀態及液體放置是否正確。啟動電泳,觀察基線平穩后開始進樣。
5. 數據采集與分析
電泳完成后,保存數據文件。使用軟件設置峰寬、閾值等參數進行數據處理,選擇報告格式并打印。例如,通過外標法定量分析樣品濃度。
6. 關機與維護
關閉電壓,取出毛細管和樣品,用超純水沖洗毛細管10分鐘。清洗電泳缸和配件,關閉儀器開關和計算機,切斷電源。長期不使用時,需按說明書保存儀器。
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